In fiecare an in luna februarie, OMS face recomandarile referitoare la compozitia vaccinului pentru sezonul urmator. Centrele OMS (WCC) pun la dispozitia producatorilor de vaccin virusul prototip (samanta primara). Acest virus prototip este izolat de la persoane bolnave de gripa.

Pentru a permite o multiplicare corespunzatoare a virusului A se foloseste metoda recombinarii genetice. Din virus sunt izolate gene care codifica hemaglutinina si neuraminidaza, care sunt apoi combinate cu gene ale unei tulpini de laborator (care se multiplica rapid pe embrioni de gaina). Astfel, virusul recombinat are proprietati antigenice conform cerintelor OMS si calitati replicative superioare. Pentru virusul de tip B, o asemenea procedura este de asemenea posibila, dar de obicei nu este necesara.

Procesul de fabricatie a vaccinului antigripal subunitar

1. Fiecare tulpina virala se obtine separat, pe diferiti embrioni de gaina, pornind de la samanta primara. Pentru fiecare tulpina virala, replicarea se realizeaza prin inseminarea a sute de mii de oua si incubarea timp de 2-3 zile la temperatura optima, de obicei 33-35°C. Pentru a evita contaminarea cu bacterii, ouale se dezinfecteaza inaintea inocularii.

2. Se realizeaza apoi recoltarea materialului, centrifugarea pentru indepartarea impuritatilor mari si ultracentrifugarea care permite obtinerea unui inalt grad de puritate a suspensiei.

3. Inactivarea virusului se face prin tratare cu formaldehida.

4. Separarea antigenelor de suprafata (hemaglutinina si neuraminidaza) de pe membrana virala se realizeaza folosind detergentul bromura de trimetil-cetil-amoniu (TCAB).

5. Hemaglutinina si neuraminidaza sunt separate de celelalte componente virale prin ultracentrifugare, iar detergentul este indepartat prin dializa.

6. Moleculele hemaglutinina si neuraminidaza prin agregare spontana formeaza rozete (vezi fig.). Acestea sunt introduse intr-o solutie tampon care contine saruri de sodiu, potasiu, calciu si magneziu si o cantitate mica de conservant tiomersal pentru a asigura sterilitatea si a preveni contaminarea cu bacterii.

7. Aceasta procedura se realizeaza separat pentru fiecare din cele 3 tulpini ale vaccinului. Ultima etapa consta in amestecarea celor 3 componente si incarcarea suspensiei obtinute in seringi de 0,5 ml.

In fiecare an vaccinul antigripal trece printr-un control sever al calitatii. Imediat ce vaccinul a fost produs se initiaza procedura de inregistrare anuala. Se realizeaza doua studii clinice pentru vaccin (in luna iunie) la persoane tinere si varstnici pentru evaluarea eficientei si a tolerantei.